在手術室和凈化室的使用過程中，無菌概念的強度可能直接影響手術的成敗，甚至影響患者的生命。因此，所有參與者應該嚴格遵守無菌操作原則。

（1）一旦外科手術人員“洗手”，就不再允許其手臂接觸未消毒的物品并穿著無菌的手術服。背部，腰部以下和肩膀上方應視為有細菌區域，而不是接觸區域。另外，請勿觸摸手術臺邊緣下方的布。

（2）儀器和物品不得轉移到操作人員的背后。掉落在無菌紙上或手術臺邊緣之外的器械和物品不得撿起并重新使用。

（3）手術過程中如果手套損壞或接觸細菌，應更換另一只無菌手套；如果前臂或肘部被細菌接觸，則應更換手術外套或無菌套管。如果無菌毛巾，布片和其他材料已經弄濕，并且無菌隔離功能不再完整，則應立即進行更換。如果條件不允許，應蓋上干燥的無菌紙。

（4）在手術室凈化手術期間，同側手術人員如需換位應調換位置。

（5）暫時未使用的儀器和物品應放在儀器桌上，并用無菌毛巾覆蓋。鋒利的器械和針腳應指向上方，以防止無菌敷料滲透到其中；需要植入體腔的物品應使用專用工具或無菌敷料固定，不得用手直接觸摸。

（6）手術室凈化隔離技術：在切開空器官之前，應先用生理鹽水墊保護周圍組織，并及時清除流出物。受污染的器械敷料應放置在受污染的托盤中，并且不再使用。外科醫生更換手套。

（7）在手術室凈化作業期間，盡量限制訪客人數，減少污染機會。訪客不應站立得太高或太靠近醫生，也不應經常在室內走動。